| Information | |
|---|---|
| has gloss | eng: Zymography is an electrophoretic technique, based on SDS-PAGE, that includes a substrate copolymerized with the polyacrylamide gel, for the detection of enzyme activity. Samples are prepared in the standard SDS-PAGE treatment buffer but without boiling, and without a reducing agent. Following electrophoresis, the SDS is removed from the gel (or zymogram) by incubation in unbuffered Triton X-100, followed by incubation in an appropriate digestion buffer, for an optimized length of time at 37°C. The zymogram is subsequently stained (commonly with Amido Black or Coomassie Brilliant Blue), and areas of digestion appear as clear bands against a darkly stained background where the substrate has been degraded by the enzyme. These protocols, however, are subject to much adjustment. For instance, D. melanogaster digestive glycosidases generally survive reducing conditions (i.e. the presence of 2-mercaptoethanol or DTT) and to an extent heating. Indeed, the separations following heating to 50°C tend to exhibit a substantial increase in band resolution, without appreciable loss of activity. |
| lexicalization | eng: zymography |
| instance of | c/Biological techniques and tools |
| Meaning | |
|---|---|
| Russian | |
| has gloss | rus: Зимография — электрофоретическая технология, основанная на SDS-PAGE, которая включает субстратную сополимеризацию с полиакриламидным гелем, для обнаружения ферментативной активности. Образцы готовят в стандартно обработанном SDS-PAGE буфере, но без кипячения и без редуцирующего агента. После электрофореза, SDS удаляется из геля (или зимограммы) выдерживанием в небуферезированном Тритон X-100, затем следует выдерживание в подходящем расщепляющем буфере, за оптимальный отрезок времени при 37 °C. Далее, зимограмма окрашивается (обычно Амидным Чёрным и Кумасси брильянтовым голубым), при этом, в том месте, где субстрат был расщеплён ферментом, проявляются области расщепления в виде отчётливых полосок на тёмно окрашенном фоне. Эти протоколы, однако, нуждаются в сильных уточнениях. Например, пищеварительная гликозидаза D. melanogaster выживает в редуцированных условиях (то есть в присутствии 2-меркаптоэтанола или DTT) и при объёмном подогреве. |
| lexicalization | rus: зимография |
| Media | |
|---|---|
| media:img | Plasmodium knowlesi hemoglobinase imprint.jpg |
Lexvo © 2008-2025 Gerard de Melo. Contact Legal Information / Imprint
